Que técnica de separação para que composto?

Os métodos de separação ou de preparação da amostra mais frequentemente utilizadas em Cromatografia antes da injeção no detetor são:

1. A cromatografia em fase gasosa (CG): utilizada para constituintes gasosos e vaporizados, tais como solventes, produtos de decomposição de plásticos, pesticidas, hidrocarbonetos, álcoois, etc. A CG recorre a um gás vetor, normalmente hélio (He) devido às suas propriedades (gás inerte e denso), mas poderão também ser utilizados outros gases como o árgon (Ar), azoto (N2) ou hidrogénio (H2). Na primeira parte do processo de CG, as amostras são injetadas na coluna cromatográfica, situado num forno a temperatura controlada a fase móvel e estacionária é aquecida, a separação ocorre em função das suas diferenças de distribuição entre as fases gasosa e estacionária. Os compostos separados são detetados à saída da coluna e podem ser identificados e quantificados num cromatograma, que é uma imagem formada utilizando diferentes tipos de detetores (detetores de condutividade térmica, detetores de ionização por chama, detetores de espectrometria de massa). A CG é uma técnica fiável e precisa, sendo frequentemente utilizada para análises ambientais, industriais e médicas.
2. A cromatografia em fase líquida (ou CLHP): utilizada para constituintes líquidos, como medicamentos, produtos alimentares e produtos químicos. Na CLHP, os líquidos são injetados na coluna cromatográfica cheia de fases estacionárias seletivas e são separados em função das suas afinidades químicas com a fase estacionária. Os compostos separados são detetados à saída da coluna e podem ser identificados e quantificados utilizando diferentes tipos de detetores (detetores de UV, detetores de fluorescência, detetores de condutividade). A CLHP é uma técnica de separação polivalente e sensível, uma vez que permite a separação de muitos tipos de compostos líquidos com elevada resolução e exatidão.
3. A cromatografia em camada fina (CCM): utilizada para constituintes sólidos, sólidos de líquidos e misturas, tais como produtos vegetais, produtos farmacêuticos, produtos alimentares, etc. Neste processo, os compostos são depositados numa superfície de sílica ou de resinas carregadas, que atuam como fase estacionária. A fase móvel, frequentemente um solvente ou uma mistura de solventes, é levada através da fase estacionária por ação capilar. Isto permite a separação de compostos em função da sua carga líquida e das interações químicas com a fase estacionária. Os componentes separados podem ser visualizados utilizando diferentes tipos de reveladores, tais como azul patente, luz UV, reagentes de coloração, etc. A cromatografia em camada fina é uma técnica simples, rápida e económica para a separação e identificação de compostos sólidos e misturas.
4. A cromatografia iónica (CI): utilizada para iões dissolvidos em soluções, tais como sais, ácidos e álcalis. Na CI, os iões são separados e função da sua afinidade química com a fase estacionária, frequentemente uma resina carregada, e a sua diferença de carga líquida. A fase móvel, frequentemente uma solução tampão num meio básico, permite a eluição dos iões separados da coluna cromatográfica. Os componentes separados são detetados na saída da coluna utilizando diferentes tipos de detetores, como detetores de condutividade, detetores de UV, etc. A cromatografia iónica é uma técnica de separação altamente seletiva e sensível para iões dissolvidos em soluções.
5. Cromatografia de exclusão estérica (CES): utilizada em biologia e química para separar moléculas de grandes dimensões, como proteínas, polímeros, enzimas, péptidos, ácidos nucleicos e outras macromoléculas. É também utilizada para determinar a distribuição do peso molecular de um polímero. Na CES, uma coluna cromatográfica é enchida com resinas carregadas, geralmente esferas de gel de polímero poroso ou celulose com poros de diferentes tamanhos. As moléculas de grande dimensão são impedidas de entrar nos poros, sendo assim retardadas pela coluna cromatográfica, enquanto as moléculas mais pequenas entram nos poros e são eluídas mais rapidamente. As moléculas são assim separadas em função do seu tamanho. As vantagens da CES incluem alta resolução, elevada sensibilidade, ampla gama de pesos moleculares e quantidade reduzida da amostra necessária.

É importante notar que cada técnica de separação ou sistema de separação, tem as suas próprias vantagens e desvantagens em termos de resolução, sensibilidade, rapidez, custo, etc. Em ambiente de laboratório a destilação, destilação fracionada evaporação, extração líquido-líquido são técnicas simples de executar (exemplo a CCM) , mas podendo necessitar a ebulição dos compostos. A cromatografia poderá ser simples ou requerer equipamentos específicos (Cromatógrafo e detetor).